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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
G-418（Geneticin，遺傳霉素），也稱為G418，是一種氨基糖苷類抗生素，其結構與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似。G-418能通過抑制轉座子Tn601，Tn5的基因表達，干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成，對原核和真核等細胞都有毒性。
在分子遺傳實驗中，G-418是穩定轉染最常用的抗性篩選試劑。當neo基因被整合進真核細胞DNA后，能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA，從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達，使細胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養基中生長。G-418的這一選擇特性，已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。
主要參數
分子式：C20H40N4O10·2H2SO4
分子量：692.7
性狀：白色或灰色粉末
溶解性：易溶于水
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸，-20℃保存，有效期24個月。
使用說明
可用PBS緩沖液溶解本產品，配制50 mg/mL或其他濃度的儲存液，過濾除菌后分裝成小份置于-20℃保存。臨用前融化均勻后稀釋至所需濃度。溶液避免反復凍融。
篩選哺乳動物細胞，推薦起始篩選濃度為400 μg/mL。篩選植物細胞，推薦起始篩選濃度為10 μg/mL。篩選酵母，推薦起始濃度為500 μg/mL。建議根據具體篩選材料及起始濃度作用效果進行調整，確定最佳篩選濃度。
以篩選哺乳動物細胞為例，將細胞制成懸液稀釋至1000個細胞/mL，取100μL細胞懸液加入含培養基的24孔板中，將每孔中G-418終濃度調整至0，100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000μg/mL等梯度，每3-5天更換含G-418的篩選液，培養10-14天，以使全部細胞死亡的最低G-418濃度進行下一步篩選。此步驟僅供參考，可根據實驗試劑情況調整。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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