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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
本產品ECL化學發光試劑盒是一種高靈敏度的化學發光試劑盒，基本原理是以luminol為基礎的ECL化學發光。本產品能與二抗上偶聯的辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）發生化學反應，產生熒光，通過用X光片壓片或其它適當熒光成像設備（CCD相機等）檢測樣品。
本公司目前生產的ECL化學發光試劑盒有兩種，分別是G2014 ECL化學發光試劑盒和超敏ECL化學發光試劑盒。對于豐度較高的目的蛋白檢測，例如內參蛋白等，推薦使用G2014，可檢測含量大于等于2 ng的目的蛋白。而對于低豐度較難檢測的目的蛋白，推薦使用，該產品靈敏度較G2014提高至少5倍，可檢測到pg級含量的蛋白，且發光更穩定。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；4℃避光保存，有效期12個月。如果長期不用，可以-20℃保存更長時間。
操作步驟
1. 配制ECL工作液：將ECL A液和ECL B液等體積混合，注意4℃避光保存。現配現用，2天內使用。
2. Western實驗中PVDF膜經二抗孵育后，多次洗滌，濾紙吸去多余液體。在曝光匣上貼兩層PE手套或者其他透明薄膜，將PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣兩層薄膜之間，加入混合好的ECL工作溶液覆蓋在膜上放置1-2 min。
3. 用濾紙或吸水紙吸去ECL工作液，蓋上層薄膜開始壓膠片。
4. 壓完的膠片用顯影、定影試劑進行顯影和定影。根據發光強度調整曝光條件。
注意事項
1. ECL A液和B液在吸取過程中必須要更換吸頭，A液和B液相互污染后會導致A液或B液逐漸失效，另外金屬離子的污染會降低本試劑的靈敏度，請注意用干凈吸頭。使用后密封保存。
2. 如果曝光后背景很深，可能原因有二抗濃度過高，或一抗濃度過高，或者封閉液不合適，換用其他封閉液。
3. 如果熒光迅速淬滅，可能原因是目的條帶熒光過強，導致HRP迅速消耗ECL。
4. 如果沒有發光信號，可能是目的蛋白表達很弱，可延長壓片時間。
5. 操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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