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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細胞培養(yǎng)過程中，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細胞間蛋白質，使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃ pH 8.0條件下消化能力最強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解，起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑，溶液偏堿性時呈紫紅色，偏酸性時呈橘紅色，近中性時呈粉紅色。
本產品為0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s緩沖液，含0.9 mM EDTA，無酚紅指示劑，經0.22 μm過濾除菌。
儲存與運輸
干冰（dry ice）運輸；-20℃保存，有效期12個月。避免反復凍融。
操作說明
貼壁細胞
1. 吸去細胞培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞去除殘余的血清。
2. 加入適量本產品覆蓋細胞，室溫靜置消化1-5 min。
1. 顯微鏡下觀察，當細胞出現(xiàn)明顯收縮，用移液槍輕輕吹打細胞較容易將細胞吹打下來時，吸除胰酶細胞消化液，加入含血清的細胞培養(yǎng)液，輕輕吹打下細胞，制成細胞懸液，即可直接傳代培養(yǎng)。如果用移液槍輕輕吹打時很難使細胞從板底脫落，表明消化時間不夠，可加入胰酶細胞消化液重新消化。切忌避免過度消化。
注意事項
1. 由于組織或細胞性質不同，實驗人員應依據(jù)具體情況，確定最佳消化時間；消化細胞時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁和生長狀況。
2. 本產品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被微生物污染。
3. 本產品不宜4℃長期保存，避免反復凍融，建議分裝成小份后-20℃保存。
4. 對于胰酶中EDTA、酚紅的選擇，可以根據(jù)實驗需要，對于一般的腫瘤細胞，選擇含EDTA的胰酶消化液。對于較敏感、脆弱的細胞，例如原代細胞及很容易消化的細胞，選擇不含EDTA的胰酶消化液，如果細胞特別敏感，需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細胞儀檢測細胞凋亡，則選用不含EDTA的胰酶消化液。
5. 由于Hank’s溶液中NaHCO3含量較低，不建議將本產品用于37℃的CO2培養(yǎng)箱中消化，如果放入CO2相，溶液會迅速變酸性。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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