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MTT 檢測試劑盒

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貨號:
FKU0190
產品規格:
200T
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產品詳情 操作說明 注意事項

產品簡介

本產品MTT檢測試劑盒,廣泛應用于細胞增殖和活性測定,以及藥物對細胞毒性的檢測。MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,中文名噻唑藍。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源底物MTT還原為不溶于水的藍紫色甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。再利用二甲基亞砜(DMSO)溶解細胞中的甲臜沉積物,用酶標儀于490 nm或570 nm波長處測定其光吸收值,在一定細胞數范圍內,甲臜形成的量與活細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,活細胞數越多,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。使用本試劑盒檢測細胞活性時,在進行反應后需吸除上清,因此不能用于懸浮細胞的檢測。如需檢測懸浮細胞,建議使用本公司其他產品。


儲存與運輸

冰袋(wet ice)運輸;4℃避光保存,有效期3個月;或-20℃避光保存,有效期6個月,避免反復凍融。



操作步驟

1. 貼壁細胞處理:待細胞貼壁后,按照實驗設計進行加藥、轉染等處理;

2. 細胞活性檢測:每孔加入20 μL MTT工作液,在細胞培養箱內孵育4 h;

3. 去除上清:完成孵育后,會發現孔板底部出現少量紫色結晶,可在40倍顯微鏡下觀察。用移液槍小心吸除孔板內上清溶液(切勿吸到底部紫色結晶);

4. 顯色:向孔板中加入100 μL DMSO,37℃孵育15 min左右(可用手指輕微敲擊板底小幅度震蕩),待紫色結晶全部溶解。如果紫色結晶較小較少,溶解的時間會短一些;如果紫色結晶較大較多,可適當延長溶解時間;

5. 檢測:在波長490 nm或570 nm處測定吸光度。如無570 nm濾光片,可使用560-600 nm濾光片。


注意事項

1. DMSO在較低溫度時會凝固,可于37℃復溶后不影響使用。

2. 本試劑盒檢測原理是依賴于脫氫酶催化的反應,樣品中如有較多還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測,需設法去除。

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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