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腺病毒

來源:萬物生物   發布時間:2021-11-01

腺病毒是一類中等大小、無包膜的雙鏈DNA病毒,已知可導致人類輕度至重度呼吸道疾病。腺病毒在研究中的優勢包括它們的大包裝容量(>8 kb)、高滴度和高水平的轉基因表達。此外,這些病毒能夠以幾乎100%的效率靶向廣泛的分裂和非分裂細胞類型。不像慢病毒某人逆轉錄酶病毒,腺病毒不會整合到宿主基因組中。腺病毒的缺點包括短暫的轉基因表達,以及由病毒衣殼誘導的實質性免疫反應。

腺病毒可以通過幾種方法產生,其中最常見的涉及腺病毒質粒在哺乳動物細胞或微生物(包括細菌和酵母)中的同源重組。兩個質粒,稱為穿梭質粒和腺病毒(也稱為骨架)質粒,被重組到一個包含兩個質粒序列的DNA分子中。然后可以將這種DNA分子轉染到哺乳動物包裝細胞系中,產生腺病毒顆粒。。

腺病毒成分

腺病毒基因組是一個線性的36Kb雙鏈DNA (dsDNA)分子,包含多個重剪接轉錄物。基因組的兩端是我已轉換terminal repeats (ITRs)。基因分為早期(E1-4)和晚期(L1-5)轉錄本。有57種可接受的人腺病毒類型,大多數腺病毒載體基于Ad5。基于Ad5的載體使用柯薩奇-腺病毒受體(CAR)進入細胞。

重組腺病毒刪除了兩個基因:E1E3E1由腺病毒包裝線293911;它從病毒載體中的缺失使病毒復制能力下降。E3參與逃避宿主免疫,并不是病毒產生的關鍵。這兩個成分的缺失導致轉基因包裝容量為>8 Kb。構建體包含左右臂,以促進轉基因同源重組到腺病毒質粒中。

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