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特殊染色

來源:萬物生物   發布時間:2021-11-02

特殊染色

為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現的異常物質、病變及病原體等,需要分別選用相應的顯示這些成分的染色方法進行染色。包括:膠原纖維染色(Masson等)、網狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色(磷鎢酸蘇木素)、脂肪染色(蘇丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。

Masson染色

Masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合,膠原纖維呈藍色,肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一,色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關。膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌纖維素、神經膠質呈紅色,胞核黑藍色。主要用于區分膠原纖維和肌纖維。

PAS染色(糖原染色)

主要用來檢測組織中的糖類。全稱為過碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiffPAS),又稱糖原染色,其原理為過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,變為紅色,定位于胞漿上,在組織學上, PAS染色應用范圍廣泛:鑒別細胞內空泡狀性質、心肌病變及其他心血管疾病的診斷、糖原累積病診斷和研究、糖尿病診斷和研究,除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外,還可以觀察腎小球基底膜、結腸杯狀細胞中性黏液物質、阿米巴滋養體和霉菌的著色。

番紅-固綠染色

番紅-固綠染色(植物染色)適用于高等植物根、莖、葉的染色。番紅是堿性染料能顯示維管束植物木質化、木栓化和角質化的組織。固綠是酸性染料,是一種染含有漿質的纖維素細胞組織的染色劑。導管可以被番紅染色,篩管可以被固綠染色。

番紅-固綠染色(軟骨)的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅結合呈現紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而成綠色或藍色,與呈現紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區分開。

油紅OOil Red O)染色

油紅O是一種脂溶性偶氮染料,是很強的脂溶劑和染脂劑,能特異性地使組織和細胞內中性甘油三脂、脂質以及脂蛋白等染色。當組織切片置入染液時,染料則離開染液而溶于組織內的脂質(如脂滴)中,使組織內的脂滴呈紅色。用于分析細胞樣品中脂質狀況。注意:油紅O染色只能適用于冰凍切片或新鮮組織。

蘇丹Ⅲ染色

脂肪和蘇丹染液有比較強的親和力,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質的異常沉著。需用冰凍切片,染色后脂肪呈猩紅色,細胞核呈藍色。

姬姆薩染色

姬姆薩染是由天青與伊紅組成。各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,被染成粉紅色;嗜堿性顆粒如細胞核蛋白或淋巴細胞胞漿為酸性物質,與堿性染料美藍或天青結合,被染成紫藍色;中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合,呈淡紫色。

甲苯胺藍(Toluidine Blue O)

甲苯胺藍不僅含有兩個發色團,還含有兩個助色團,為堿性染料,甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色??扇炯毎耸怪仕{色;肥大細胞胞質內含有肝素和組織胺等異色性物質遇到甲苯胺藍可呈異染性紫紅色,可用于尖銳濕疣的初篩及肥大細胞的檢測,例如色素性蕁麻疹

天狼星紅染色

由于膠原呈堿性,與酸性染料起強烈反應。天狼星紅就是一種很強的酸性染料,它可以和膠原纖維反應使膠原纖維產生明顯的雙折光現象。天狼星紅染色膠原纖維呈紅色,胞核呈綠色,余呈黃色。偏光顯微鏡可以分辨不同的纖維類型。

基底膜六胺銀染色

基底膜六胺銀染色是一種經典顯示基底膜的方法。組織經過碘酸氧化,使基底膜內的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀。氯化金可使金屬銀轉變為更穩定的金屬金,同時使背景更清晰。六胺銀染色能清晰地顯示基底膜,在腎病變中應用最多,常用來觀察腎小球毛細血管基底膜在炎性損傷時如斷裂、增生、折疊等形態改變。

尼氏染色

神經細胞內都含有尼氏體,但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態的變化而變化,尼氏體是神經元內合成蛋白質合成的重要部位,當神經元受到刺激后,胞體內的尼氏體會明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。

普魯士藍反應(Prussian blue reaction

普魯士藍反應又稱為含鐵血黃素染色,即經過亞鐵氰化鉀和稀酸處理后可以產生藍色,常見于吞噬細胞內會間質內,主要顯示三價鐵鹽。Perls普魯士藍是非常經典的組織化學反應,是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統優良的方法,其染色原理為:亞鐵氰化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來,三價鐵與亞鐵氰化鉀反應,生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵氰化物普魯士藍,所以該反應被稱為普魯士藍反應。三價鐵的亞鐵氰化物是一種很穩定的化合物,在反應后可用紅色染色劑進行復染,如核固紅、伊紅、中性紅等。

Perls stain常用于顯示局部組織內各種出血性病變,常見于吞噬細胞內。在判斷含鐵血黃素沉積時,用Perls反應可以得到證實,該染色方法可以很好的區分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩定性好、可以長期保存、不易產生沉淀、應用范圍廣、可以進行復染。該染色液的復染液采用核固紅,是最經典、最常用的復染液。

β-半乳糖苷酶染色(β-Galactosidase Staining )

β-半乳糖苷酶染色是一種基于衰老時SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調而對衰老細胞或組織進行染色檢測的試劑盒。在普通的光學顯微鏡下就可以觀測到細胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養細胞的衰老檢測,也可以用于組織切片的衰老檢測。β-半乳糖苷酶染色試劑盒以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會生成深藍色產物,光學顯微鏡下很容易觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。本試劑盒僅染色衰老細胞,對衰老前的細胞(presenescent cells)、靜止期細胞(quiescent cells)、永生細胞(immortal cells)或腫瘤細胞等不會染色。對于組織切片或組織塊,可以檢測的樣品數量視樣品的大小而定,對于普通的切片也至少足夠檢測100個樣品,使用6孔板測定,足夠測定100個樣品。

Von Kossa染色

鈣在人體內大量存在,構成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運送、肌肉收縮、神經傳導等也起重要作用。許多染料可以于鈣形成螯合物,包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復合物。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法,本產品原理在于該法是一種金屬置換法,硝酸銀溶液作用于含有不溶性鈣鹽的切片時,鈣被銀所置換,銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀,適用于大量樣本的鈣鹽組織染色


    部分結果展示


                         油紅O染色                                                                                        ALP染色


                                茜紅素染色                                                                                      LFB染色


                              天狼星紅染色                                                                                      masson染色


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臨床檢測科研轉化       病理染色分子互作

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