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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
鬼筆環肽是由鬼筆鵝膏真菌(Amanita phalloides)產生的一種環肽，可與F肌動蛋白結合，使F肌動蛋白保持穩定。FITC熒光物質標記的鬼筆環肽可特異的與真核細胞的F-actin結合，從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。
本產品為熒光染料FITC標記的鬼筆環肽，可用于細胞或組織的微絲熒光檢測，經染色后細胞骨架呈綠色熒光。本產品使用時推薦的稀釋比為1:300-1:500。按照每張片子需要200 μL染色工作液，本產品足夠用于70-120張片子的染色。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；-20℃避光保存，有效期12個月。
使用方法
1. 經甲醛固定的細胞爬片或組織切片，PBS洗滌，稍甩干后用組化筆畫圈使組織或細胞位于圓圈中央。
2. 向圓圈內滴加含0.1% Triton X-100的PBS或破膜液完全覆蓋組織，室溫孵育10 min，PBS洗3次，每次5 min。
3. 將本產品用PBS按照1:300-1:500稀釋，配成鬼筆環肽染色工作液。向圓圈內滴加鬼筆環肽染色工作液室溫避光染色60-120 min，PBS清洗切片3次。
4. （可選做）向組織上滴加DAPI染色試劑染細胞核8-10 min，PBS清洗切片3次。
5. 切片稍甩干后，滴加抗熒光淬滅封片劑封片，熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察。
注意事項
1. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
2. 甲醇可以破壞actin蛋白，因此樣本前期固定不能使用含有甲醇的固定液。
3. 鬼筆環肽通常不具有細胞通透性，極少用于活細胞染色。
4. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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